QUANTITATIVE MICROSCOPY (LYCOPODIUM SPORE METHOD)

 QUANTITATIVE MICROSCOPY (LYCOPODIUM SPORE METHOD)  ::

It is an important analytical technique for powdered drugs especially when chemical and other methods of evaluation of crude drugs fail as accurate measures of quality Lycopodium spores are very characteristic in shape and appearance and exceptionally uniform in size (25 um ) on an average 94000 spores per mg of powdered lycopodium are present 
A powdered drug is evaluated by this technique if it contains ::
(1) well defined particles which may be counted e.g. starch grains or pollen grains 
(2) Single layered cells or tissues the area of which may be traced under suitable magnification and actual area calculated or 
(3) the objects of uniform thickness the length of which can be measured under suitable magnification and actual area calculated 
The percentage purity of an authentic powdered ginger is calculated using the following equation 
    Percentage purity = N*W*94000*100
                                    ------------------------
                                            S*M*P
Where N- number of  characteristic structures (e.g. starch grains) in 25 fields 
            W- weight in mg of lycopodium taken 
            S - number of lycopodium spores in the same 25 fields 
            M- weight in mg of the sample calculated on the basis of sample dried at 105 .c 
            P - 286000 in case of ginger starch grains powder 
Lycopodium spore method can be used for evaluation of powdered clove ginger cardamom nutmeg and umbelliferous fruits 
    The study of microscopical or histological characteristics is useful in detection of adulterants in both entire and powdered forms of crude drugs Apart from variations in cellular arrangement many a times the type of cuticle of epidermis and cell inclusion also help in detection of the adulterants the common adulterant of Digitalis purpurea is Verbascum thapsus containing candelabra trichomes while digitalis contains either multicellular uniseriate trichomes or glandular trichomes The powdered cloves contain neither prisms of calcium oxalate nor the sclereids but in case of powdered clove stalks both are present Starch is absent in clove but is present in the powdered clove fruits The leaves of Digitalis purpurea do not contain calcium oxalate crystals while they are present in all other varieties of Digitalis Surinam quassia does not contain calcium oxalate but jamaica quassia contains prismatic crystals of calcium oxalate 
            The size of a starch grain is also important in detection of adulterants in case of  Cinnamomum cassia the diameter of starch grains is usually more than 10 microns The dimension of fibres also helps in detecting adulteration in case of cinnamon The number of sclerenchymatous cells per square cm in cardamom is one of the criteria for detection of varieties of cardamom seed in powdered form 

TRANSLATE IN HINDI ::

मात्रात्मक माइक्रोस्कोपी (लाइकोपोडियम बीजाणु विधि) ::
यह पाउडर दवाओं के लिए एक महत्वपूर्ण विश्लेषणात्मक तकनीक है, खासकर जब कच्ची दवाओं के मूल्यांकन के रासायनिक और अन्य तरीके गुणवत्ता के सटीक माप के रूप में विफल हो जाते हैं लाइकोपोडियम बीजाणु आकार और उपस्थिति में बहुत विशिष्ट होते हैं और आकार में असाधारण रूप से एक समान होते हैं (25 माइक्रोन) औसतन प्रति मिलीग्राम पाउडर लाइकोपोडियम में 94000 बीजाणु मौजूद होते हैं
इस तकनीक द्वारा एक पाउडर दवा का मूल्यांकन किया जाता है यदि इसमें ::
(1) अच्छी तरह से परिभाषित कण होते हैं जिन्हें गिना जा सकता है जैसे। स्टार्च कण या पराग कण
(2) एकल परत वाली कोशिकाएँ या ऊतक, जिनका क्षेत्रफल उपयुक्त आवर्धन पर पता लगाया जा सकता है और वास्तविक क्षेत्रफल की गणना की जा सकती है या
(3) समान मोटाई की वस्तुएँ, जिनकी लंबाई उपयुक्त आवर्धन पर मापी जा सकती है और वास्तविक क्षेत्रफल की गणना की जा सकती है
एक प्रामाणिक पाउडर अदरक की प्रतिशत शुद्धता की गणना निम्न समीकरण का उपयोग करके की जाती है
प्रतिशत शुद्धता = N*W*94000*100
------------------------
S*M*P
जहाँ N- 25 क्षेत्रों में विशिष्ट संरचनाओं (जैसे स्टार्च कण) की संख्या
W- लिए गए लाइकोपोडियम का मिलीग्राम में वजन
S- समान 25 क्षेत्रों में लाइकोपोडियम बीजाणुओं की संख्या
M- 105 डिग्री सेल्सियस पर सुखाए गए नमूने के आधार पर गणना किए गए नमूने का मिलीग्राम में वजन
P- अदरक स्टार्च कण पाउडर के मामले में 286000
लाइकोपोडियम बीजाणु विधि का उपयोग लौंग अदरक इलायची जायफल और छाता फलों के पाउडर के मूल्यांकन के लिए किया जा सकता है सूक्ष्म या ऊतकीय विशेषताओं का अध्ययन अपरिष्कृत औषधियों के संपूर्ण और चूर्ण दोनों रूपों में मिलावटों का पता लगाने में उपयोगी है। कोशिकीय व्यवस्था में भिन्नताओं के अलावा कई बार एपिडर्मिस के क्यूटिकल का प्रकार और कोशिका समावेशन भी मिलावटों का पता लगाने में मदद करते हैं। डिजिटलिस पर्पूरिया का सामान्य मिलावटकर्ता वर्बास्कम थापसस है जिसमें कैंडेलब्रा ट्राइकोम होते हैं जबकि डिजिटलिस में या तो बहुकोशिकीय एकरूप ट्राइकोम या ग्रंथि संबंधी ट्राइकोम होते हैं। चूर्णित लौंग में न तो कैल्शियम ऑक्सालेट के प्रिज्म होते हैं और न ही स्केलेरिड, लेकिन चूर्णित लौंग के डंठलों के मामले में दोनों मौजूद होते हैं। लौंग में स्टार्च अनुपस्थित होता है, लेकिन चूर्णित लौंग के फलों में मौजूद होता है। डिजिटलिस पर्पूरिया की पत्तियों में कैल्शियम ऑक्सालेट क्रिस्टल नहीं होते हैं, जबकि वे डिजिटलिस की अन्य सभी किस्मों में मौजूद होते हैं। सूरीनाम क्वासिया में कैल्शियम ऑक्सालेट नहीं होता है, लेकिन जमैका क्वासिया में कैल्शियम ऑक्सालेट के प्रिज्मीय क्रिस्टल होते हैं। स्टार्च के दाने का आकार भी कैल्शियम ऑक्सालेट का पता लगाने में महत्वपूर्ण है। दालचीनी कैसिया के मामले में मिलावट करने वाले स्टार्च के कणों का व्यास आमतौर पर 10 माइक्रोन से अधिक होता है। फाइबर का आयाम भी दालचीनी के मामले में मिलावट का पता लगाने में मदद करता है। इलायची में प्रति वर्ग सेमी में स्केलेरेन्काइमेटस कोशिकाओं की संख्या पाउडर के रूप में इलायची के बीज की किस्मों का पता लगाने के मानदंडों में से एक है।

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